Дезоксиниваленол (ДОН) обычно вырабатывается розовой плесенью Fusarium graminearum. ДОН из семейства трихотеценовых микотоксинов вырабатывается грибками живущими на злаковых сырьевых продуктах, таких как пшеница, кукуруза, ячмень и силос.
Последствия токсикологического воздействия, связываемые с ДОН, включают тошноту, отказ от пищи, гастроэнтерит, понос, угнетение иммунитета и заболевания крови.
Методика анализа:
Экстракция:
1. Смешать 10 грамм размолотого образца и 100 мл дистиллированной или деионизированной воды и интенсивно перемешивать в течение 3 минут.
2. Отфильтровать экстракт, пропустив не менее 5 мл через фильтровальную бумагу или через шприцевой фильтр Neogen (#9420).
3. Образец готов к анализу.
Анализ:
Перед началом анализа необходимо провести экстракцию образцов.
1. Добавить по 100 мкл коньюгата в лунки.
2. Добавить по 100 мкл контрольных и исследуемых образцов.
3. Перемешать. Перенести по 100 мкл в лунки с антителами. Инкубировать 5 минут.
4. Слить жидкость из лунок.
5. Промыть лунки дистиллированной водой и удалить оставшуюся воду с помощью фильтровальной бумаги.
6. Добавить по 100 мкл субстрата в лунки. Можно использовать 12-канальный дозатор. Инкубировать 5 минут.
7. Добавить по 100 мкл стоп-буфера в лунки.
8. Используя спектрофотометр, определить оптическую плотность при длине волны 650 нм и рассчитать концентрацию микотоксина.
- Время экстракции – 3-5 минут
- Время анализа – 2 инкубации по 5 минут
- Единый объём дозирования всех реагентов – 100 мкл
- Нет необходимости в термостате
Хранение:
|
2-8 °C
|
Количество лунок:
|
48
|
Стандарты:
|
0, 0.25, 0.5, 1 и 2 ppm
|
Экстракция:
|
Дистиллированная или деионизированная вода
|
Детектирование:
|
При длине волны 650 нм
|
Предел детектирования:
|
0,1 ppm
|
Предел количественного обнаружения:
|
1 ppm
|
Диапазон количественного обнаружения:
|
0,25 - 2 ppm (при необходимости количественного анализа образцов, содержащих более 250 ppb необходимо разбавить образец)
|
Валидированные продукты:
|
пшеница, пшеничная мука, пшеничная крупка, пшеничные отруби, кукуруза, кукурузная мука, кукурузный отсев, ячмень, осоложенный ячмень*, овес, мука из жмыха кукурузных зародышей*, кукурузно-глютеновая мука*, кукурузно-глютеновый корм*, кукурузный силос**, смеси кукурузы с соей, сухая послеспиртовая барда*, семена льна, просо (камут), сорго, корма для домашних питомцев*, попкорн, кинва, рис, рожь, соевая мука, мука подсолнечника, общий смешанный рацион (TRM)**, свекловичный жом*, кукурузные отруби**, кукурузный крахмал, солома**, травяной силос**, волокна льна, рисовая шелуха и соевая мука
* Обычно требует подстройки рН.
** Обратиться в компанию Neogen за специальной методикой
|