Обнаруженные в 1989 году фумонизины являются семейством микотоксинов, вырабатываемых различными видами плесневых грибов Fusarium. Эта плесень обычно заражает кукурузу (более того, она считается присутствующей в кукурузе) и рис. Таким образом, потенциальная возможность обнаружить фумонизин в кормах и продуктах питания достаточно высока. Фумонизин действует по-разному на различных животных. Он может служить причиной рака пищевода у людей. Агентство охраны окружающей среды относит фумонизин к канцерогенам категории II-B.
Методика анализа:
Экстракция:
1. Смешать 5 грамм размолотого образца и 25 мл 70% метанола и интенсивно перемешивать в течение 3 минут.
2. Отфильтровать экстракт, пропустив не менее 5 мл через фильтровальную бумагу или через шприцевой фильтр Neogen (#9420).
3. Образец готов к анализу.
Анализ:
Перед началом анализа необходимо провести экстракцию образцов.
1. Добавить по 100 мкл коньюгата в лунки.
2. Добавить по 100 мкл контрольных и исследуемых образцов.
3. Перемешать. Перенести по 100 мкл в лунки с антителами. Инкубировать 5 минут.
4. Слить жидкость из лунок.
5. Промыть лунки дистиллированной водой и удалить оставшуюся воду с помощью фильтровальной бумаги.
6. Добавить по 100 мкл субстрата в лунки. Можно использовать 12-канальный дозатор. Инкубировать 5 минут.
7. Добавить по 100 мкл стоп-буфера в лунки.
8. Используя спектрофотометр, определить оптическую плотность при длине волны 650 нм и рассчитать концентрацию микотоксина.
- Время экстракции – 3-5 минут
-
Время анализа – 2 инкубации по 5 и 10 минут
-
Единый объём дозирования всех реагентов – 100 мкл
-
Нет необходимости в термостате
Хранение:
|
2-8 °C
|
Количество лунок:
|
48
|
Стандарты:
|
0, 0.5, 1, 3, 6 ppm
|
Экстракция:
|
70% метанол
|
Детектирование:
|
При длине волны 650 нм
|
Предел детектирования:
|
0.2 ppm
|
Предел количественного обнаружения:
|
1 ppm
|
Диапазон количественного обнаружения:
|
1–6 ppm (при необходимости количественного анализа образцов, содержащих более 6 ppm необходимо разбавить образец)
|
Валидированные продукты:
|
ячмень, свекловичный жом*, кукуруза, кукурузная мука, мука из жмыха кукурузных зародышей*, кукурузно-глютеновая мука*, смеси кукурузы с соей, кукурузный экстракт*, сухая послеспиртовая барда*, отфильтрованный осадок послеспиртовой барды*, просо, зерна сорго, овес, шелуха овса, чищеный овес, волокна овса, корма для домашних животных*, попкорн, картофель (белый), рисовый глютен, рисовая шелуха, сырой рис, рожь, соевая гидролизная мука, соевые бобы, мука из соевых бобов, мука подсолнечника, пшеница и пшеничные отруби
* Может требовать подстройки рН
|