Обычно зеараленон вырабатывается плесневым грибком Fusarium graminearum, который также вырабатывает дезоксиниваленол (ДОН). Таким образом, если в пробе обнаружен зеараленон, то велика вероятность присутствия и других микотоксинов плесневых грибков фузарий. Зеараленон относится к эстрогенным микотоксинам, поскольку часто вызывает эстрогенную реакцию у животных.
Методика анализа:
Экстракция:
1. Взвесить 10 г ± 0.1 г образца в чашке. Засыпьте содержимое 1-го пакетика MAX 2 для водной экстракции в ту же чашку.
2. Добавить 50 мл дистиллированной или деионизированной воды и интенсивно перемешивать в течение 3 минут.
3. Отфильтровать экстракт, пропустив не менее 5 мл через фильтровальную бумагу или через шприцевой фильтр Neogen (#9420).
4. Разбавить фильтрат водой, смешав 100 мкл экстракта образца с 900 мкл дистиллированной воды в чистой пробирке для разбавления образца.
5. Образец готов к анализу.
Анализ:
Перед началом анализа необходимо провести экстракцию образцов.
1. Добавить по 100 мкл коньюгата в лунки.
2. Добавить по 100 мкл контрольных и исследуемых образцов.
3. Перемешать. Перенести по 100 мкл в лунки с антителами. Инкубировать 5 минут.
4. Слить жидкость из лунок.
5. Промыть лунки дистиллированной водой и удалить оставшуюся воду с помощью фильтровальной бумаги.
6. Добавить по 100 мкл субстрата в лунки. Можно использовать 12-канальный дозатор. Инкубировать 5 минут.
7. Добавить по 100 мкл стоп-буфера в лунки.
8. Используя спектрофотометр, определить оптическую плотность при длине волны 650 нм и рассчитать концентрацию микотоксина.
